學術(shù)不端文獻論文查重檢測系統(tǒng) 多語種 圖文 高校 期刊 職稱 查重 抄襲檢測系統(tǒng)
TUNEL實際上是 分子生物學 與形態(tài)學相結(jié)合的研究方法,對完整的單個凋亡細胞核或凋亡小體進行原位染色,能準確地反應(yīng)細胞凋亡典型的 生物化學 和形態(tài)特征,可用于石蠟包埋組織切片、冰凍組織切片、培養(yǎng)的細胞和從組織中分離的細胞的細胞形態(tài)測定,并可檢測出極少量的凋亡細胞,因而在細胞凋亡的研究中被廣泛采用。 Caspase家族在介導(dǎo)細胞凋亡的過程中起著非常重要的作用,其中caspase-3為關(guān)鍵的執(zhí)行分子,它在凋亡信號傳導(dǎo)的許多途徑中發(fā)揮功能。 Caspase-3正常以酶原 (32KD)的形式存在于胞漿中,在凋亡的早期階段,它被激活,活化的Caspase-3由兩個大亞基 (17KD)和兩個小亞基 (12KD)組成,裂解相應(yīng)的胞漿胞核底物,最終導(dǎo)致細胞凋亡。
凋亡細胞 DNA 含量的流式細胞計分析 方法 收集細胞→70% 冷乙醇(PBS 稀釋)4 °C 固定過夜→PBS 洗滌,1 000 rpm × 10 min→RNase A(0.5 mg/ml)37 °C 消化 30 min→PI(50 mg/ml)染色,室溫避光 15 min→FACScan 分析 DNA 亞二倍體的形成及細胞 ...
然而,凋亡細胞調(diào)節(jié)上述過程的機制目前仍不清楚。 作者的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),凋亡代謝物分泌組(secretome)不是簡單的被動排空細胞內(nèi)容物,而是一個調(diào)控過程。 caspase介導(dǎo)的質(zhì)膜PANX1通道開放,促進了細胞凋亡過程中持續(xù)釋放有活力的代謝物。
細胞凋亡過程中細胞核染色質(zhì)的形態(tài)學改變分為三期:Ⅰ 期的細胞核呈波紋狀(rippled)或呈折縫樣(creased),部分染色質(zhì)出現(xiàn)濃縮狀態(tài);Ⅱa 期細胞核的染色質(zhì)高度凝聚、邊緣化;Ⅱb 期的細胞核裂解為碎塊,產(chǎn)生凋亡小體(圖 1)。 凋亡細胞體積變小,細胞質(zhì)濃縮。 凋亡Ⅰ期(pro-apoptosis nuclei)的細胞核內(nèi)染色質(zhì)高度盤繞,出現(xiàn)許多稱為氣穴現(xiàn)象(cavitations)的空泡結(jié)構(gòu);Ⅱa 期細胞核的染色質(zhì)高度凝聚、邊緣化;細胞凋亡的晚期,細胞核裂解為碎塊,產(chǎn)生凋亡小體(圖 2)。 磷脂酰絲氨酸(Phosphatidylserine, PS)正常位于細胞膜的內(nèi)側(cè),但在細胞凋亡的早期,PS 可從細胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細胞膜的表面,暴露在細胞外環(huán)境中(圖 3)。